陈思远 · Biology Researcher

• 主导建立基于CRISPR/Cas9的基因编辑流程，针对T细胞中3个候选免疫抑制靶点实现敲除效率>85%，并将编辑后的CAR-T细胞用于后续功能验证。

• 负责肿瘤细胞与CAR-T共培养的杀伤实验，采用流式细胞术检测不同效靶比下的靶细胞裂解率；在10:1效靶比时达72%特异性杀伤，较未编辑组提升34%。

• 优化原代免疫细胞培养方案，将CAR-T体外扩增周期从14天缩短至10天，活率维持≥90%，支持每月4轮以上的功能测试。

• 通过ELISA定量检测共培养上清中IFN-γ和IL-2分泌水平，靶点敲除组细胞因子释放量较对照组增加2.1倍（IFN-γ: 1540 pg/mL vs 730 pg/mL），验证免疫激活增强效果。

• 筛选并验证3个新型肿瘤相关抗原的CAR结构，流式细胞术评估CAR表达率均>60%；选定其中一个抗原靶点推进至动物模型预实验，使后续体内实验的肿瘤抑制率提升约40%。

• 为评估PD-1/CTLA-4双特异性抗体联合溶瘤病毒的抗肿瘤协同效应，设计并构建MC38结肠癌皮下移植瘤小鼠模型，设置单药与联合治疗组（每组10只），每3天测量肿瘤体积并绘制生长曲线；联合治疗组在给药第21天肿瘤体积抑制率达78%，显著高于双抗单药组（45%）和溶瘤病毒单药组（52%）。

• 优化联合给药方案（双抗5 mg/kg，i.p.，每周2次；溶瘤病毒1×10⁸ PFU，瘤内注射，每周1次），对比同步与序贯给药，发现同步给药可最大程度激活肿瘤微环境，使肿瘤内CD8⁺ T细胞浸润密度提升2.3倍，小鼠中位生存期延长至35天（单药组22天）。

• 评估联合疗法安全性：每日监测小鼠体重变化并采集心、肝、肾组织进行H&E染色病理分析，联合治疗组体重波动<5%，未见明显器官毒性或炎症反应，确认该组合具有良好的耐受性。

• 建立多参数药效评估体系，利用流式细胞术检测肿瘤浸润免疫细胞亚群；联合治疗组中CD8⁺ T细胞比例由治疗前的15%显著提升至42%，调节性T细胞比例从10%降至4%，提示免疫抑制性微环境被有效重塑。

• 主导完成3批次独立重复实验（共60只小鼠），综合统计显示联合治疗组完全缓解率达20%（6/30），双抗单药组与溶瘤病毒单药组均未出现完全缓解，该结果为该联合策略进入IND-enabling研究提供了关键药效学依据。

综合素质优异