李芳 · 细胞培养员

• 主导CHO细胞稳定转染与克隆筛选，通过优化脂质体转染条件和有限稀释法，成功获得52株高表达单克隆，其中3株目标蛋白表达量较初始提升1.8倍。

• 建立并执行细胞库管理规范，完成3批次主细胞库（MCB）和工作细胞库（WCB）的制备与冻存；经无菌检测、支原体和内毒素验证全部合格，细胞复苏存活率稳定在92%以上。

• 系统筛选6种商业化培养基组合并优化补料策略，将批次培养活细胞密度从4.2×10⁶ cells/mL提升至7.8×10⁶ cells/mL，同时维持贴壁率>95%。

• 严格执行GMP级无菌操作流程，在10次小规模培养项目中保持零污染记录；编写标准化操作文件（SOP）8份，覆盖细胞传代、取样检测及液氮管理全流程。

• 主导某单抗项目从3L摇瓶至200L生物反应器的Fed-batch工艺放大，通过DOE优化补料策略与接种密度，使最终活细胞密度达1.2×10⁷ cells/mL，抗体产量较初始方案提升45%，成功支持客户IND申报。

• 负责3个临床前项目的批次培养与Fed-batch培养工艺开发，在50L反应器上采用响应面法优化温度、pH及溶氧参数，将产物关键质量属性（聚体含量＜2%）稳定控制在放行标准内，累计交付6批次GMP级中间体。

• 主导跨项目细胞培养工艺参数转移，建立200L规模反应器的批次一致性评估流程，引入过程分析技术（PAT）实时监控葡萄糖与乳酸代谢，使3个项目的工艺可重复性标准差降至＜5%，缩短项目周期约20%。

• 针对某双抗项目，应用DOE筛选培养基组分与补料时机，在100L反应器上实现Fed-batch培养，产物表达量突破1.8 g/L，且糖基化谱图与早期小试批次匹配度达98%，加速客户IND申报进程。

• 在GMP车间负责CAR-T细胞全流程生产，主导慢病毒转导、细胞扩增及流式检测，累计完成12批临床级产品制备；平均转导效率达68%，细胞活率高于95%，产量满足3项IND申报要求。

• 针对5起关键偏差，牵头进行根本原因分析并制定CAPA措施，将批次偏差率从8%降至2%以内，确保产品质量持续符合GMP标准。

• 建立并优化7份GMP相关SOP，包括慢病毒转导操作规范、细胞扩增参数控制及流式检测放行标准；培训3名新员工通过上岗考核，提升团队操作一致性。

• 主导流式检测方法验证，对每批次产品进行CD3+、CAR+等关键指标检测，累计完成200+样本分析，产品纯度均不低于92%，支持产品放行与稳定性研究。

• 主导高效表达重组蛋白的CHO细胞株构建项目，通过优化转染参数（脂质体与电转比例及DNA用量），将质粒转染效率从45%提升至82%，单克隆筛选成功率提高至75%，全程仅用4周即获得稳定表达候选株。

• 针对100余个单克隆进行稳定性传代评估，利用Western blot与ELISA协同检测，连续监测20代次，筛选出5株表达量稳定在2.5 g/L以上的候选株，较初始群体平均表达量提升60%。

• 建立包含30株候选细胞的稳定性传代数据库，通过每5代检测蛋白表达量及糖基化图谱，确保关键质量属性波动小于10%，为后续10 L生物反应器放大提供可靠种子批。

• 引入响应面法优化无血清培养基配方，结合批式补料策略，使目标蛋白在10 L摇瓶中表达量达到3.2 g/L，较初始批次提升85%；Western blot验证产物纯度>95%，减少下游纯化成本约30%。

因在工艺优化项目中提升产量20%获评

针对细胞培养污染风险提出的预防措施被公司采纳